培養基制備一般在化驗室中進行，主要是對培養基和玻璃儀器進行滅菌，主要設備為高壓滅菌鍋及于熱滅菌箱，對無菌操作要求不高。

　　滅菌方法主要有干熱、濕熱滅菌等。

　　(1)干熱滅菌  直接利用火焰將微生物燒死（如燒接種環、載玻片和試管口等）。不能用火焰滅菌的物品則利用熱空氣滅菌，將物品放在烘箱中加熱。為了保證滅菌效果，一般規定：135~140℃滅菌3～5h; 160～170℃滅菌2～4h；180~200℃滅菌0.5～1h。此法適用于玻璃、金屬和木質的器皿。在滅菌過程中或滅菌后未降溫時，不宜打開箱門，否則紙與棉塞會燃燒，玻璃儀器也易破裂。

　　(2)濕熱滅菌  在各類濕熱滅菌法中，經高壓蒸汽滅菌效果最好，其蒸汽溫度可達121℃，能將耐熱的芽孢在30min內全部殺死。但對某些易破壞的物質，如某些糖或有機含氧化合物，宜在0.06MPa下(11O℃)滅菌15~30min。使用高壓滅菌鍋時，盡量將鍋內的冷空氣排盡，以免壓力表的指示壓力已到規定值而鍋內溫度達不到要求溫度。另外，滅菌結束后，要緩慢放汽，以免降壓太快使液體培養基噴染棉塞。

　　3.保溫室

　　恒溫箱的容量有限，因此利用大三角瓶及卡氏罐等容器培養微生物，應放在保溫室中進行。保溫室不宜過大，通常面積為2㎡，高2m左右。墻壁用保溫材料，室頂在適當位置設置換氣筒。室內使用暖氣或電熱器配合自動控溫調節設備進行控溫，應注意安全。

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